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當(dāng)前位置:首頁   >  產(chǎn)品中心  >  化學(xué)試劑  >  液相色譜級溶劑  >  CAEQ-4-019028-1000HPLC色譜純?nèi)軇?正戊烷

HPLC色譜純?nèi)軇?正戊烷

簡要描述:HPLC級別溶劑具有以下優(yōu)點:
·低紫外線吸收,確保靈敏度;
.可用于熒光檢測;
-嚴(yán)格控制非揮發(fā)性物質(zhì)、游離酸、游離堿和水的含量低;
-嚴(yán)格的梯度測試以檢測干擾峰和基線漂移情況;

  • 產(chǎn)品型號:CAEQ-4-019028-1000
  • 廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
  • 更新時間:2024-09-05
  • 訪  問  量:788

詳細(xì)介紹

HPLC,≥99.9%

通常來說,HPLC對流動相的基本要求是∶①與固定相不互溶,不發(fā)生化學(xué)反應(yīng);②對樣品有適宜的溶解度,要求k值在1~10范圍內(nèi)(可用范圍)或2~5(最佳范圍),溶解度太大,k值太小,不利于分離;溶解度太小,k值太大,可能使樣品在流動相中產(chǎn)生沉淀;⑧必須與檢測器相適應(yīng)。例如用紫外檢測器,流動相本身在檢測波長處應(yīng)無吸收;④流動相的粘度要小,可以降低色語柱的阻力而提高柱效;⑤純度高,不含機(jī)械雜質(zhì)。

高效液相色譜流動相的選擇及注意事項如下:

1、流動相的性質(zhì)要求。一個理想的流動相溶劑應(yīng)具有低粘度、與檢測器兼容性好、易于得到純品和低毒性等特征。選好填料(固定相)后,強(qiáng)溶劑使溶質(zhì)在填料表面的吸附減少,相應(yīng)的容量因子k降低;而蛟弱的溶劑使溶質(zhì)在填料表面吸附增加,相應(yīng)的容量因子k升高。理論塔板數(shù)N一般與流動相的粘度成反比。所以選擇流動相時應(yīng)從以下幾個方面考慮∶@流動相不得改變填料的任何性質(zhì)。低交聯(lián)度的離子交換樹脂和排阻色譜填料有時遇到某些有機(jī)相會溶脹或收縮,從而改變色諾柱填床的性質(zhì)。堿性流動相不能用于硅膠柱系統(tǒng)。酸性流動相不能用于氧化鋁、氧化鎂等吸附劑的柱系統(tǒng)。②純度。色諾柱的壽命與流動相有較大的關(guān)系,特別是其所含雜質(zhì)在柱上有大量沉積的溶劑。③與檢測圈匹配。使用紫外檢測器時,所用流動相在檢測波長下不得有吸收,或吸收很小。④粘度要低。高粘度溶劑會影響溶質(zhì)的擴(kuò)散、傳質(zhì),降低柱效,還會使柱壓增加,分離時間延長。最好選擇沸點在100C以下的流動相。

2、流動相的pH值。采用反相色譜法分離弱酸或弱堿樣品時,通過調(diào)節(jié)流動相的pH值,以抑制樣品組分的解離,增加組分在固定相上的保留,并改善峰形的技術(shù)稱為反相離子抑制技術(shù)。對于弱酸,流動相的 pH值越小,組分的k值越大,當(dāng)pH值遠(yuǎn)遠(yuǎn)小于弱酸的pKa值時,弱酸主要以分子形式存在;對弱堿,情況相反。分析弱酸樣品時,通常在流動相中加入少量弱酸,常用50mmol/L磷酸鹽緩沖液和1%酣酸溶液;分析弱堿樣品時,通常在流動相中加入少量弱堿,常用50mmol/L磷酸鹽緩沖液和30mmol/L三乙胺溶液。

3、流動相的選擇。在化學(xué)鍵合相色譜法中,溶劑的洗脫能力直接與它的極性相關(guān)。在正相色諾中,溶劑的強(qiáng)度隨極性的增強(qiáng)而增加﹔通常采用烷經(jīng)加適量極性調(diào)整劑。反相色譜的流動相通常以水作基礎(chǔ)溶劑,再加入一定量的能與水互溶的極性調(diào)整劑,如甲醇、乙腈等,極性調(diào)整劑的性質(zhì)及其所占比例對溶質(zhì)的保留值和分離選擇性有顯著影響。一般情況下,甲醇-水系統(tǒng)能滿足多數(shù)樣品的分離要求,且粘度小、價格低,是反相色譜常用的流動相.

4、流動相的就過。所有溶劑使用前都必須經(jīng)0.45um 濾膜濾過,以除去雜質(zhì),色譜純試劑也不例外。用速膜過跳時,特別要注意分清有機(jī)相濾膜和水相濾膜。有機(jī)相濾膜一般用于過濾有機(jī)溶劑,過濾水溶液時流速低或濾不動。水相濾膜只能用于過濾水溶液,嚴(yán)禁用于有機(jī)溶劑,否則濾膜會被溶解。溶有速膜的溶劑不得用于HPLC,對于混合流動相,可在混合前分別越過,如需混合后疏過,選有機(jī)相旎膜。對于冰箱過夜保存的流動相,在使用前仍建議過濾后再使用。

5、流動相的脫氣,所用流動相必須先脫氣,否則容易產(chǎn)生氣泡,影響泵的正常工作。氣泡還會影響柱的分離效率,影響檢測器的靈敏度、基線穩(wěn)定性,甚至無法檢測。此外,溶解在流動相中的氧還可能與樣品、流動相甚至固定相反應(yīng)。溶解氣體還會引起溶劑pH值的變化,結(jié)果容易產(chǎn)生誤差。溶解氧能與某些溶劑(如甲醇、四氫味喃)形成有紫外吸收的絡(luò)合物,此絡(luò)合物會提高背景吸收,并導(dǎo)致檢測靈敏度的輕微降低,但更重要的是,會在梯度淋洗時造成基線漂移。超聲脫氣比較好,20分鐘的脫氣時間基本上就夠了。

6、流動相的制備。用高純度的試劑配制流動相,必要時照紫外分光光度法進(jìn)行溶劑檢查,應(yīng)符合要求,水應(yīng)為新鮮制備的高純水,利用超級純水圈制得或用重蒸餾水。凡規(guī)定pH值的流動相應(yīng)使用精密 pH計進(jìn)行調(diào)節(jié)。應(yīng)配制足量的流動相備用.

7、流動相的貯存。流動相一般貯存于玻璃、聚四氟乙烯或不銹鋼容器內(nèi),不能貯存在塑料容圈中。因許多有機(jī)溶劑如甲醇、乙酸等可浸出塑料表面的增塑劑,導(dǎo)致溶劑受污染。這種被污染的溶劑如用于HPLC系統(tǒng),可能造成柱效降低。貯存容器一定要蓋嚴(yán),防止溶劑揮發(fā)引起組成變化,也防止氧和二氧化碳溶入流動相。磷酸鹽.乙酸鹽緩沖液很易長霉,應(yīng)盡量新鮮配制使用。


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