果聚糖是由果糖聚合而成的線型或分支型的多糖總稱。果聚糖是一類有利于人體健康的碳水化合物,進入結腸后可以成為腸胃菌的營養(yǎng)物質。GB5009.255—2016《食品安全國家標準食品中果聚糖的測定》規(guī)定了食品中果聚糖含量的離子色譜法測定方法,適用于乳及乳制品、嬰幼兒配方食品、嬰幼兒谷類輔助食品、固體飲料、配制酒中單獨添加的低聚果糖、多聚果糖或菊粉含量的測定。
果聚糖的測定過程中您是否遇到過困難?
蔗糖酶,果聚糖酶的選擇和使用您是否有過疑問?
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安譜實驗帶您一起解讀
果聚糖測定過程中的那些事兒!
實驗原理
試樣經熱水浸提,樣液中的蔗糖經蔗糖酶水解成葡萄糖和果糖,葡萄糖和果糖經硼氫hua鈉還原成相應的糖醇,多余的硼氫hua鈉用乙酸中和。樣液中的果聚糖經過果聚糖酶水解成果糖和葡萄糖,經離子色譜-脈沖安培檢測器測定果糖含量,通過換算系數,折算得到果聚糖的含量。
實驗過程
檢測條件(參考GB5009.255—2016中儀器參考條件2)
實驗譜圖
▲圖一:果糖標準溶液色譜圖(16mg/L)
▲圖二:果糖標準曲線圖
▲圖三:彩面樣品色譜圖
實驗結果
1.彩面中的果聚糖含量
2.質控樣及標準品回測結果
產品信息
小貼士
如何根據實驗方法選擇適用的酶并進行配置?(GB5009.255-2016方法中用到兩種酶,蔗糖酶和果聚糖酶)
一、若所選酶和方法一致,則可直接按照方法進行實驗。如GB5009.255-2016中蔗糖酶,方法中具體要求如下:
3.1.3 蔗糖酶:來源于酵母,酶活力≥300U。
3.2.3 蔗糖酶溶液(4.5U/mL):將蔗糖酶(活力為300U)溶解于66mL馬來酸鈉緩沖溶液,分裝到2mL的離心管中,-20℃保存,可放置6個月。使用前需測定酶活力。
安譜實驗提供的蔗糖酶:CFHN-E-SUCR,蔗糖酶 300 Units,和方法要求的酶活一致,可按照方法3.2.3直接進行稀釋實驗。
二、若所選酶和方法不一致,則需要根據方法中所用酶活進行換算后實驗。如GB5009.255-2016中果聚糖酶,方法中具體要求如下:
3.1.7 果聚糖酶:來源于黑曲霉,酶活力≥10000U。
3.2.9 果聚糖酶溶液(455U/mL):將果聚糖酶(活力為10000U)溶解于22mL乙酸鈉緩沖溶液,分裝到2mL的離心管中,-20℃保存,可放置6個月。使用前需測定酶活力。
安譜實驗可提供兩種果聚糖酶:
a:一種溶液型:CFHN-E-FRMXLQ-10mL,果聚糖酶混合物,2,000 U/mL
這里的果聚糖酶的濃度是2,000 U/mL,10ml的總酶活是20000U,是方法中總酶活力的2倍??蛻粼谑褂眠^程中,只要保證果聚糖酶溶液的濃度為455U/mL,根據3.2.9方法,可以有兩種配置方法。
①可以量取5mL的E-FRMXLQ溶解于22mL乙酸鈉緩沖溶液進行分裝;
②也可以將全部10mL的E-FRMXLQ溶解于44mL乙酸鈉緩沖溶液中進行分裝;
b:一種固體型:CFHN-E-FRMXPD,果聚糖酶混合物,20,000 Units
這里的固體型產品以總酶活計,配置過程需保證果聚糖酶溶液的濃度為455U/mL,即將總酶活為20,000 Units的固體果聚糖酶混合物溶解在44mL乙酸鈉緩沖溶液中進行分裝,注意,這個固體型酶的溶解過程,根據酶的使用說明書,先將該固體果聚糖酶全部溶解在去離子水中,再用相應的緩沖溶液進行稀釋。
酶的使用過程中,客戶也可以根據需要測試的樣品數量,依照所選酶的具體酶活,換算成需要的量。